中國農業科學院植保所開發出提高植物病毒載體介導的外源蛋白表達量的新策略
時間:2025-04-22 09:59 來源:中國農業科學院植物保護研究所
近日,中國農業科學院植物保護研究所作物病毒病害監測與防控創新團隊、作物病原生物功能基因組研究創新團隊和農產品加工研究所合作在植物學著名期刊《植物生物技術》(Plant Biotechnology Journal)在線發表了題為“Editing of an antiviral host factor boosts plant growth and yield of plant viral vector-mediated heterologous protein expression”的研究論文。該研究利用基因編輯敲除植物的抗病毒因子NbGRP,所獲得的NbGRP突變植株不僅促進植物生長,而且顯著提高植物病毒表達載體介導的外源蛋白的表達水平,為利用植物高效生產外源蛋白提供了新思路。


與哺乳動物表達系統相比,植物作為生物反應器具有顯著優勢,包括更高的可擴展性、更低的生產成本、更低的人類病原體污染風險以及更短時間內實現高水平蛋白表達的能力。植物病毒作為細胞內專性寄生物,已被成功改造成蛋白表達載體,可用于疫苗、單克隆抗體等靶標產物的合成。然而,受到RNA沉默等抗病毒防御反應的影響,植物病毒載體介導的外源蛋白存在表達量低等缺陷,限制了其應用范圍。如何提高目標蛋白的表達量是利用植物病毒載體進行外源蛋白高效表達需考慮的關鍵因素。
該研究發現了一個響應番茄褐色皺果病毒侵染的抗病毒因子——富含甘氨酸的細胞壁結構蛋白NbGRP;利用CRISPR/Cas9介導的基因編輯技術敲除NbGRP促進本氏煙的生長,導致葉片增大,生物量增加2倍以上;NbGRP的敲除還增強了本氏煙對其它常用的植物病毒表達載體如煙草花葉病毒載體、馬鈴薯X病毒載體的敏感性,進而顯著提高了這些病毒介導的綠色熒光蛋白的表達量。此外,NbGRP的敲除本氏煙還能夠顯著提高GFP納米抗體的產量。
相關成果提出了一種通過靶向敲除抗病毒寄主因子從而提高植物病毒表達載體介導的靶標蛋白產量的策略。與現有技術敲除RDR6等抗病毒因子導致植株發育異常不同,該研究通過敲除NbGRP基因未觀察到明顯的發育缺陷,反而促進了植物的生長,有利于進一步降低生產成本,為疫苗、納米抗體、酶等靶標蛋白的高效生產提供了重要思路。
植保所科研助理方鑄、在讀博士生趙鑫茹和杜敏為論文的共同第一作者,楊秀玲研究員、周雪平教授和農產品加工研究所的郭維研究員為論文通訊作者。本研究得到了國家重點研發計劃、寧夏自治區重點研發計劃和國家自然科學基金項目的資助。
原文鏈接:https://doi.org/10.1111/pbi.70089